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欧美央行两大掌门人的统一话术 吹响了利率见顶的“前哨”?
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峰值。 债券投资者太平洋投资管理公司(
Pimco
)的投资组合经理康斯坦丁·维特(Konstantin Veit)表示,“最新的欧洲央行利率决议重新强化了我们的观点,即虽然其可能进一步加息,但我们认为利率已接近峰值”。 鲍威尔和拉加德的态度转变有据可依 数据也支持鲍威尔和拉加德的态度转变。几个月来,大西洋两岸的通胀率一直在下降。美国6月份的通胀率达到3% ,而欧元区则降至5.5%。欧元区7月份的物价增长数据将于下周一公布,届时通胀率预计进一步下降。 富达国际(Fidelity International)的全球宏观经济学家安娜·斯图普尼茨卡(Anna Stupnytska)表示,“随着紧缩政策继续通过信贷渠道进入实体经济,我们看到欧元区加息的传导机制发挥作用的更清晰信号”。 欧元区的经济正在快速走弱。过去两个季度产出停滞不前,预计下周一公布的二季度GDP数据充其量仅温和增长。本周对采购经理和银行的调查显示私营部门活动急剧下滑,人们担心该地区第三季度经济进一步疲软。 意大利联合信贷银行首席经济顾问埃里克·尼尔森(Erik Nielsen)表示,“能源通胀正在下降,欧元区GDP现在看起来非常糟糕。所以,明智的中间派终于与鸽派站在一起了”。 美国的经济表现更好。美联储工作人员周四放弃了对今年经济衰退的预测,美国第二季度GDP年化增长2.4%,超出预期。 鲍威尔警告称,美国经济的韧性可能意味着需要采取更多紧缩政策来抑制物价增长,并表示“随着时间的推移,更强劲的增长可能会导致通胀上升”。不过他补充道,“我们已经做了很多工作,紧缩措施的全面效果尚未显现”。 数据决定一切 拉加德周四表示,欧洲央行将对是否需要进一步收紧政策“持开放态度”。“举证责任将在于数据”,她表示,同时提出了欧洲央行有可能像美联储上个月一样跳过一次会议,然后再恢复加息。 未来的利率路径很大程度上将取决于7月和8月的CPI数据,以及欧洲央行在9月会议结束后立即发布的通胀预测。但拉加德表示,她还将研究劳动力市场、投资和通胀预期方面的数据。 法国外贸银行(Natixis)经济学家德克·舒马赫(Dirk Schumacher)预测,欧元区通胀将持续下降,因此欧洲央行不太可能进一步加息。“从表面上看,欧洲央行在是否再次加息问题上转向了开放的立场”,他表示。 拉加德对通胀前景给出了平衡的看法。她警告说,俄罗斯退出允许乌克兰从其黑海港口出口谷物的协议,可能会对粮食价格造成“新的上行压力”,“不断发展的气候危机”也可能造成这种情况。工资或利润率增长高于预期也可能导致通胀居高不下。 但她同时表示,欧元区“近期经济前景恶化,主要是由于国内需求疲软”,并补充道,这应该会减轻价格压力,特别是如果再加上能源价格下跌的话。 万神殿宏观经济咨询公司(Pantheon Macroeconomics)的经济学家克劳斯·维斯特森(Claus Vistesen)表示,鉴于他们收紧政策的速度很快,而且过去一个月的经济数据不佳,这种转变“并不令人意外”。 但他也称,潜在的“糟糕的”二季度薪资增长数据,仍将“在9月份让欧洲央行的鹰派人士归于沉寂之前再度冒尖”。
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金融界
2023-07-29
多伦多网红连锁咖啡店突然关店!老板人间蒸发!欠员工、供应商钱
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张发票。 这家店过去已知的供应商包括
Pilot
Coffee、De Mello、Hatch 和 Sealtest Dairy。 当部分供应商在接受采访时就不愿公开发表评论。 这位员工就表示,“他们欠了很多薪水。我至少已经没拿到两份工资和小费了。” 这名前雇员还向安大略省劳工委员会提起了诉讼。 这家咖啡店此前一度非常火爆,以提振情绪的蘑菇咖啡和供应季节性南瓜拿铁而闻名。店里还有可颂,面包等烘焙甜品。 曾在全市拥有三个分店,并拥有一家专卖天然补充剂系列产品的网店。 然而这家网店貌似还在运营,官网没有任何通知。 值得一提的是,这家店关闭时间是在该地址申请重新分区获得批准后发生的。据说这里要为改建城市公园和综合用途建筑让路。 至于老板为什么突然人间蒸发,目前没有人知道。 作者:晓晨
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超级爆料君
2023-07-28
粉红姐
Pink
低调逛多伦多唐人街旁集市!网友疯狂示爱彩色表情包大战
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以偶遇明星的城市。 就在前天 美国巨星
Pink
在社交媒体INS上发布了2张照片 她儿子踩着滑轮车 在色彩缤纷的涂鸦小巷玩耍~ 而这里就是 多伦多唐人街旁的肯辛顿市场! Kensington Market 美国创作型歌手明星
Pink
周一在多伦多罗杰斯中心开演唱会 一票难求! 多伦多幸运地成为p!nk巡演 北美第一站~ 宣传她第九张专辑《Trustfall》~ 她在台上演绎了 《Never Gonna Not Dance Again》 《So What》等热门歌曲~ 歌迷们为之疯狂 多伦多CN塔罗杰斯中心都 变粉了! 在全场火爆的演唱会第二天 7月25日,这位巨星带着儿子 一起领略多伦多这个 多姿多彩的多元文化城市~ 母子俩在城中最有活力 和色彩缤纷的肯辛顿市场~ 骑车,逛店,拍照~ 儿子Jameson在 涂鸦小巷里玩得可开心了!~ 来回骑滑轮车~ 照片里有时尚文化街区的 古董精品店和艺术空间
Pink
似乎很喜欢这里的涂鸦~ 她发布的照片标题为 “多伦多爱的故事!” 短短两天收获12万的 有网友看到她在当地小店 看闪闪发光的粉色连衣裙~ 和儿子一起买一些 西班牙油条当点心! 还去了冰激凌店Dolce Gelato。 她还被拍到在肯辛顿市场 踩滑轮车~ 拿着Cocktail Emporium店的购物袋 (难道是因为这家店的粉色
pink
外墙?) 就这家↓↓ 结果,
Pink
的照片 带火了多伦多 和肯辛顿市场~ 网友们纷纷大赞留言 有人疯狂示爱 彩色表情包大战! 你们感受下 这是我需要的氛围感 大爱! 很高兴你享受这里的一切 多伦多是世界上最棒的城市之一 谢谢分享你好家人的旅途 也很高兴你能让儿子感受加拿大 啥?!你和儿子竟然在肯辛顿市场 简直太棒~ 涂鸦小巷和肯辛顿市场是必到景点 我上次也在那里看到了明星 美丽的多伦多! 有
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和家人在更完美了 想象下你在肯辛顿闲逛 偶遇
Pink
和家人 我们太喜欢你在加拿大了! 多伦多火了!
Pink
一家为多伦多 增添了一抹粉红亮色! P!nk 作者:晓晨
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超级爆料君
2023-07-28
Pimco
的Ivascyn:认为美联储加息已完结的想法是“危险的”
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美联储的加息周期可能终于完结了。然而,
Pimco
(品浩)的Daniel Ivascyn表示,明智的投资者最好要牢记,这并非定数。他并不是跟美联储接近紧缩尾声这一市场共识逆向而行。 他表示,如果通胀数据支持的话,美联储可能会在9月再次加息,不过概率“接近于扔硬币”。但他也表示,即使届时不加息,加息的风险可能仍会持续一段时间。原因之一在于,尽管按揭抵押贷款利率大幅上升,但房地产市场仍然保持韧性,部分原因是大量房主已锁定了低利率。而房地产价格高企可能会继续波及租金,给通胀指标带来上行压力。
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金融界
2023-07-28
Pimco
:认为美联储加息已完结的想法是“危险的”
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联储的加息周期可能终于完结了。 然而,
Pimco
(品浩)的Daniel Ivascyn表示,明智的投资者最好要牢记,这并非定数。 他并不是跟美联储接近紧缩尾声这一市场共识逆向而行。他表示,如果通胀数据支持的话,美联储可能会在9月再次加息,不过概率“接近于扔硬币”。 但他也表示,即使届时不加息,加息的风险可能仍会持续一段时间。原因之一在于,尽管按揭抵押贷款利率大幅上升,但房地产市场仍然保持韧性,部分原因是大量房主已锁定了低利率。而房地产价格高企可能会继续波及租金,给通胀指标带来上行压力。 “通胀有可能会仍具粘性并高于央行目标,”与他人联手管理1240亿美元
Pimco
Income Fund的Ivascyn表示,“因此,如果美联储真的暂停且今年不再行动的话,那么认为他们已经完结的想法会是危险的。”该基金2023年和过去五年的表现均超越了约90%的同类产品。 Ivascyn表示, 美联储行动的影响已经弱化,因为太多家庭和企业在疫情期间举债。低利率使得房主几乎没有动力卖房,这导致供应稀缺,进而给房价带来上行压力。 “房价可能会因此而再度加速,”他表示,“美联储现在还没准备好宣布抗通胀取得胜利。”
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金融界
2023-07-28
盟科药业:注射用MRX-4序贯口服康替唑胺片治疗糖尿病足感染全球III期临床试验在中国的主要研究者医院入组第一例受试者
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牵头,担任主要研究者(leading
PI
)。冉兴无教授是四川大学华西医院内分泌科副主任、糖尿病足诊治中心主任,中华医学会糖尿病分会常务委员及糖尿病足病与外周动脉疾病学组组长,曾主编或参编学术专著20余部,牵头制定中国糖尿病足防治指南1部及相关共识3部,作为主要成员参与制定过中国2型糖尿病诊治指南,在该领域颇有影响力。
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美通社
2023-07-27
去美元化?美国白宫:允许盟友加入金砖国家 可自行接触中国、俄罗斯等外交
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·让-皮埃尔(Karine Jean-
Pierre
)表示,允许盟友加入金砖国家,可自行接触中国、俄罗斯等外交,但希望各国也能选择如何向其公民交付成果。 阿尔及利亚和埃及是美国的两个伙伴,他们已申请加入金砖国家,而金砖国家包括巴西、俄罗斯、印度、中国和南非。当被询问,这是否代表着一种反对西方霸权的不结盟力量,卡琳回应称:“各国应该自行谈论其外交接触,我们在接触中带头实施平权议程,重点是展示我们治理和经济模式的好处。”#去美元化浪潮# (来源:Twitter) 她补充道:“美国的政策并不要求我们的合作伙伴在美国和其他国家之间做出选择,我们多次强调,美方无意限制各国同其他国家的伙伴关系。但是,我们希望各国也能选择如何向其公民交付成果。” 随着越来越多的国家寻求去美元化,人们对金砖国家经济集团的兴趣飙升,已有40多个国家有兴趣加入。据南非负责金砖国家关系的外交官透露,已有22个国家正式提出申请。 今年,金砖国家领导人会晤东道主南非已向69位领导人发出邀请,其中包括所有非洲国家元首和全球南方主要机构负责人。尽管法国总统马克龙表示有兴趣参加此次峰会,但尚未向包括法国在内的西方国家领导人发出邀请。 据南华早报(SCMP)评论,马克龙实际上已被公开边缘化。他让西方在可持续发展和绿色金融等领域处于领先地位的目标落空了。越来越多的国家不再寄希望于西方来解决他们的问题,而是寄希望于金砖国家。欧盟会抓住机会还是浪费机会?这值得市场继续观察下去。 一个很少被提及或提到的现实是,金砖国家扛起了整个新兴世界的火炬。它的成功为从拉丁美洲、西非到东南亚的其他地区奠定了基础。但如果这个代表世界下一个超级大国的充满希望的组织无法应对这一局面,那么其他国家首都的梦想就会破灭。因为,如果金砖国家不能挑战既定秩序,那么谁可以呢? 周二(7月25日),中国外交部长王毅会见南非总统部长恩查夫尼在约翰内斯堡。王毅表示,金砖机制是新兴市场国家和发展中国家最重要的合作平台,顺应时代潮流,服务大多数国家意愿,代表正确前进方向。 他说道:“面对风云变幻的国际形势,中方支持南非主办金砖国家领导人会晤,愿同南非等金砖国家一道,做大做强金砖机制,坚定倡导多边主义,积极推进金砖国家民主化。维护国际关系基本准则,维护发展中国家合法权益,促进地区和世界和平稳定。” 王毅指出,中方将一如既往支持南非维护国家权益、独立和民族尊严,愿同南方加强高层交往,深化党际交往,巩固政治互信。双方互信,扩大经贸、扶贫等领域合作,支持南非加快工业化进程,增强本土发展能力。中方支持有实力、有实力的中国企业赴南非投资兴业,希望南方为中国企业提供良好稳定的营商环境。中方愿同南非等非洲国家深化中非合作, 恩沙夫尼表示,南非高度赞赏中方致力于深化金砖国家合作,感谢中方为金砖国家安全顾问和国家安全高级代表会晤成功作出的贡献,愿同中方及金砖国家保持密切协调确保金砖国家领导人会晤取得圆满成功,开辟金砖合作新前景。南方坚定奉行一个中国政策,愿同中方加强高层交往,加强经贸、投资、矿产加工等领域合作,提升南中关系和水平。非中关系迈上新台阶。
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颜辞
2023-07-27
不到30人打造出估值10亿的AI公司 Character.AI如何创造虚拟伴侣?
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介绍的Inflection AI推出的
Pi
似乎更胜一筹。 5月23日,这款人工智能聊天机器人平台的移动版面向全球iOS和安卓用户推出。在最初的48小时内,这款应用的安卓安装量就超过了70万,超过了Netflix、Disney+和Prime Video等顶级娱乐应用。在不到一周的时间内就获得了超过170万的新安装量。 在应用程序发布之前,网页应用每月访问量超过2亿次,用户每次访问平均花费29分钟,该公司表示,这一数字比ChatGPT高出300%。该公司补充说,迄今为止,用户已经创建了超过一千万个自定义人工智能角色。 值得注意的是,Character.AI的创作团队不到30人。 最近,Character.AI推出了高级服务c.ai+,提供了与ChatGPT Plus类似的一系列特权,比如更快的响应时间,在使用高峰期间访问,以及提前访问新功能。 它还宣布与谷歌云建立战略合作伙伴关系,以建立和培训其人工智能模型。该公司表示,这笔交易将使这家初创公司使用谷歌云的张量处理器单元(Tensor Processor Units)来更快、更有效地训练和推断LLM(大型语言模型)。我们也期待看到它的进一步提升。 02 专属虚拟朋友圈 如果你可以从一千万个而不仅仅是一个AI聊天机器人中进行选择,那会怎样? 从弗拉基米尔·普京到爱因斯坦,从埃隆·马斯克到马里奥,不管是虚拟还是真实人物,你可以在Character.AI平台上和任何一个角色进行聊天。你甚至可以构建自己的聊天机器人,以进行私人一对一的对话或供其他人聊天。 自从ChatGPT取得突破性成功以来,许多挑战者都试图夺取其桂冠,Character.AI也不例外,其对生成式AI的俏皮演绎正在帮助它脱颖而出。 Character.AI使用起来很简单:你只需用电子邮件或Google等社交信息创建一个免费帐户,然后就可以开始与其数据库中的机器人聊天。 Character.AI网站主页上提供了各式各样的聊天机器人,页面顶部的角色类别包括: 人工智能助手:健身教练、小说写作助理、角色创建助理、编程助理 著名人物 :演员、音乐艺术家、作家、政治家、历史人物 虚构人物 :电影、电视节目、书籍、视频游戏、漫画和动漫中的角色 图像生成 :可以AI生成用于不同目的的图像的角色 语言学习 :旨在帮助用户学习特定语言的角色 若是想要创建自己的机器人,只需点击“创建”并按照说明进行操作即可。用户可以对角色进行充分的个性化定制,以使他们更符合自己的喜好和需求。需要注意的是,正如Character.AI聊天界面上方直言不讳的红色警示“角色说的所有话都是虚构的”,你应该意识到聊天机器人往往都是会出错的。 除了创建角色,你也可以创建聊天房间,邀请多个角色或其他用户加入群聊。这种模式既可以增加对话的趣味性和多样性,也可以让用户结识更多的朋友。群聊模式是Character.AI的独有模式,用户可以看到不同角色之间的互动和碰撞,甚至可能产生意想不到的“火花”。 不同于市面上其他的聊天机器人网站, Character.AI也提供了原创社区 ,用户可以在上面分享自己创建的角色或聊天记录,并获取其他用户的反馈和评价。用户还可以学习其他用户的创作技巧和经验,提升自己的聊天水平和创造力。 总而言之,Character.AI是一个多功能的聊天机器人平台,随着用户社区和聊天评分系统(允许用户对角色的回复进行评分)的不断壮大,这个平台的发展前景不容小觑。 03 20亿条信息的背后,是流量的井喷吗? 不难看出,Character.AI的特色在于让用户能够与各类角色进行有创意、有情感的对话。提升DAU(日活用户数)与发展UGC(用户原创内容)是它主攻的两个方向。 DAU是衡量一个产品是否受欢迎和有价值的重要指标之一。提升DAU可以反映出AI聊天机器人的用户黏性和满意度,也可以增加用户的信任和忠诚度。Character.AI提供了广阔的应用场景,比如社交技巧练习、语言学习、面试准备、故事互动等,这使得用户拥有无止境的学习和娱乐机会。 据该公司称,自去年9月测试版发布以来,用户发送了超过20亿条信息,平均每天在网站上花费两个小时。创始人认为,对话式人工智能存在无穷的潜力,世界各地的人们都能在使用它们时找到意义,无论是提高工作效率、休闲放松,还是找到一个支持你的朋友。 UGC是指用户自主创作或分享的内容,Character.AI让用户可以创造个性化的AI对话机器人。而发展UGC可以极大丰富AI聊天机器人的内容,拓宽对话的深度与广度,也可以增加用户的参与度和归属感。平台目前已经积累了上千万个聊天机器人,并根据类型进行了区分,从网红博主到影视动漫人物,应有尽有,其中大部分都来自用户用爱发电创作。 虚拟伴侣是对话式机器人的新一个井喷口吗? 国外Replika AI不止于文字对话,还让用户能够通过捏脸、更换服装、选择声音创造出虚拟人,甚至有用户宣布自己嫁给平台上的完美虚拟伴侣,因为他们就像异地恋情侣那样互相交流、发照片。 国内虚拟恋人产品Glow曾红极一时,虽然目前因研发2.0版本而下架,但从各大平台的分享和评论来看其粉丝粘性很高。 在快节奏的现代社会和高压的生活下,人们的孤独感是普遍存在的。但AI伴侣有它固有的局限性,它是虚拟的,而非实体,虚实交错时容易让用户产生幻觉。Character.AI针对这一问题也在每一个聊天框的上面进行了标注,或许影响了一些沉浸体验,但该举措在某种意义上来说是必要的。 Character.AI还设定了严格的限制机制,会自动过滤任何NSFW(不适宜工作环境浏览的内容)。这对许多同类型的AI伴侣机器人而言,都是不可思议的。Character.AI也不提供API,虽然它是开源的,用户并不能下载它在本地使用。 这可以说是它的优势,也是它的劣势,更或者说是它的特色。 04 未来,无需无所不能 DAU指标不是衡量产品是否成功的唯一标准,但对于选择To C作为当前赛道和用户导向作为产品策略的Character.AI来说,这是值得关注与耕耘的重心。 Character.AI目前还处于发展阶段,虽然月活跃用户已过千万,但还在谨慎摸索商业模式。创始人深知自己不能与大公司在功能性上展开竞争,也不奢求创造一个让大部分人都喜欢的对话机器人。Character的含义是文字、性格与角色,旨在通过文字创造独有性格的角色。 而未来是否会仅仅停留在“文字塑造虚拟朋友”上,相信Character.AI会基于用户的需求,有自己的思考。 在获得更多的融资后,Character.AI接下来将重点布局AI的记忆能力,同时用更多的算力帮助用户找到自己所喜欢的聊天方式与内容,而不是创造一个无所不能的官方对话机器人。 网红宠物视频BGM哈基米之所以能爆火,证明人们的情感联系不在于提供者有多聪明,即使没有语言能力,陪伴与感情依然存在。 当然,目前还只是起点,我们也期待更多AI+应用落地。仿生人会梦见电子羊吗?希望会的。 【声明】:本文为元宇宙之心运营团队原创,未经允许严禁转载,如需转载请联系我们,文章版权和最终解释权归元宇宙之心所有。 来源:金色财经
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金色财经
2023-07-27
加息也挡不住反弹的势头
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比特币以太坊实时行情分析
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金色财经
2023-07-27
国家疾控局、国家卫生健康委制定并印发《猴痘防控方案》
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284《危险品航空安全运输技术细则》的
PI602
分类包装要求,通过其他交通工具运输的可参照以上标准包装。猴痘病毒或其他潜在感染性材料运输应按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》(原卫生部令第45号)办理《准运证书》。污水等环境标本暂按普通生物样本运输标准执行。 国际运输。猴痘毒株或样本在国际间运输的,应规范包装,按照《出入境特殊物品卫生检疫管理规定》办理相关手续,并满足相关国家和国际相关要求。 四、猴痘病毒核酸检测要求及流程 实验室资质要求。 开展猴痘病毒核酸检测的实验室,应当符合《病原微生物实验室生物安全管理条例》(国务院令第424号)或《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》(卫办医政发〔2010〕194号)有关规定,具备设区的市级卫生健康部门备案的生物安全二级(BSL-2)实验室及以上实验室条件,并备案猴痘病毒相关实验活动。独立设置的医学检验实验室还应符合《医学检验实验室基本标准(试行)》《医学检验实验室管理规范(试行)》等要求。 开展猴痘病毒分离、培养、中和等涉及病毒扩增、使用等实验操作的实验室应具备国家卫生健康委批准的生物安全三级(BSL-3)实验室及以上实验室条件,且获得猴痘病毒实验活动批准。分离的猴痘病毒应送国家病原微生物保藏中心/国家病原微生物资源库病毒分库保藏。 实验室生物安全要求。 根据2006年公布实施的《人间传染的病原微生物名录》(简称《名录》),猴痘病毒生物危害分类为第一类,是一种高致病性病毒。按照《名录》要求,猴痘病毒的分离、培养等涉及病毒扩增及使用的实验操作需在BSL-3及以上实验室的生物安全柜内进行;非灭活采样液采集的猴痘病例样本的灭活在BSL-3实验室进行;样本灭活后猴痘病毒DNA提取、检测可在BSL-2及以上实验室或PCR检测的专门区域或房间进行。如《名录》更新,开展猴痘病毒操作的实验室生物安全要求应按最新《名录》执行。污水样本的灭活参照普通生物样本。 实验室分区要求。 原则上开展猴痘病毒核酸检测的实验室应当设置以下区域:试剂储存和准备区、标本制备区、扩增和产物分析区。三个区域在物理空间上应完全相互独立,空气应定向流通。各区功能分别是: 1.试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的制备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。 2.标本制备区:转运桶开启、标本灭活,核酸提取及加入至扩增反应管等。 3.扩增和产物分析区:核酸扩增和产物分析。 根据使用仪器的功能,区域可适当合并。如采用标本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪,标本制备区、扩增和产物分析区可合并。 主要仪器设备。 实验室应当配备与开展检验项目相适宜的仪器设备,包括:二级生物安全柜、高速台式离心机、干浴恒温器、荧光定量PCR仪、计时器、移液器。 实验室猴痘病毒核酸检测流程。 实验室接到标本后,按照标准操作程序进行试剂准备、标本前处理、核酸提取、核酸扩增、结果分析及报告。实验室应当建立可疑标本和阳性标本复检流程。 1.试剂与材料。 标本:包括病变表面拭子、痘疱液或痘疱渗出液拭子、痘痂或痘痂拭子、咽拭子、全血或血浆等标本。 核酸提取试剂盒(基因组DNA提取试剂盒):组织基因组DNA提取试剂盒或血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒。 核酸检测试剂: ①试剂:DNA聚合酶或预混的PCR反应试剂(PCR Master Mix)。 ②猴痘病毒检测引物、探针: ③阳性对照:涵盖检测靶标序列的质粒。 灭菌去离子水、无水乙醇 消毒液 ①75%乙醇:用于手部和物体表面常规消毒,开启后有效期为1周。 ②含氯消毒液:现用现配,含有效氯1000mg/L的消毒液用于物体表面常规消毒,含有效氯5000mg/L的消毒液用于感染性材料溢洒时的应急处理。 耗材:包括带滤芯的吸头、螺旋口的离心管、非螺旋口的离心管、含锆珠的粉碎管、PCR反应板和透明封膜或PCR反应管和透明盖。 BSL-2个人防护用品:包括KN95/N95口罩及以上级别的口罩、一次性隔离衣、防护眼罩或面屏、一次性帽子、鞋套、靴套和手套。 2.实验前的标本接收。 核对被检标本编号、姓名、性别、年龄及检测项目; 待检标本的状态如有异常,需注明; 待检标本长期存放在-70℃,短期存放可在-20℃,避免反复冻融。 3.核酸检测操作步骤及注意事项。 病毒核酸(DNA)的制备 操作方法按DNA提取试剂盒相应说明书进行操作,具体如下: ①提取试剂准备:第一次开启试剂盒,在使用前先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积参照瓶上标签。所有试剂在使用前应平衡至室温;所有离心步骤应在室温下进行。 ②处理样本: A.痘疱液:干拭子标本需以适当体积的含PS的PBS或DMEM重悬后检测。取100μL样本,加入80μL缓冲液,总量为180μL;标本体积不足100μL时用缓冲液补足总体积至180μL; B.病变皮疹或痘痂:取1块痂皮按质量/体积(1mg/50μL)加入相应体积含PS的PBS,研磨或匀浆处理,取80μL,然后加入100μL缓冲液; C.咽拭子、其它拭子:从采样液中取200μL标本,干拭子标本可用3mL含PS的PBS或DMEM重悬,混匀后取200μL; D.全血或血清:直接取200μL标本。 ③加入20μL蛋白酶K溶液,混匀,溶液会变清亮。若样本为病变皮疹或其它组织时,加入蛋白酶K混匀后,在56℃放置,直至组织溶解,再进行下一步骤。 ④加入200μL裂解缓冲液,充分混匀,70℃放置10分钟,或至溶液变清亮,简短离心以去除管盖内壁水珠。 需注意:加入裂解缓冲液后可能会出现白色絮状沉淀,在70℃放置后会消失。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少或提取出的DNA不纯。 ⑤加200μL无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,简短离心以去除管盖内壁水珠。 ⑥将上一步骤所得溶液和絮状沉淀均加至吸附柱中(吸附柱放入废液收集管中),8000rpm离心1分钟,弃废液。 ⑦加入500μL漂洗缓冲液1(使用前先检查是否已加入无水乙醇),8000rpm离心1分钟,弃废液。 ⑧加入500μL 漂洗缓冲液2(使用前先检查是否已加入无水乙醇),最大转速13000rpm离心3min,弃废液。 ⑨将吸附柱放回废液收集管中,最大转速13000rpm离心1分钟,尽量去除漂洗液。 ⑩将吸附柱转入一根干净的离心管中(需自行准备,试剂盒中未提供),加入50μL洗脱缓冲液或灭菌去离子水,室温放置2-5分钟,8000rpm离心1分钟。收集滤出液,做好标记,4℃或-20℃(短期)保存备用,-70℃长期保存。 核酸检测:实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测猴痘病毒核酸(PCR实验室进行)。 ①反应体系的准备:每孔20μL,加入5μL样本DNA,共计25μL;每次PCR反应,除检测标本外,应加无DNA对照(用水代替DNA)、阳性对照;所有样本,包括对照,应设复孔。 ②加样: 每根反应管中加入核酸或对照各5uL,盖紧管盖或封好透明膜,置于荧光定量PCR检测仪上。 ③扩增条件设定: ④仪器检测通道选择:使用荧光定量PCR检测仪,选择Fam荧光信号检测通道,收集设在60℃。具体设置方法参照各仪器使用说明书。 ⑤结果分析阈值设定:使用荧光定量PCR检测仪进行结果分析时,基线取3-10或6-15个循环的荧光信号,阈值设定原则为阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线最高点,也可根据仪器噪音情况调整阈值。 核酸检测结果判断 ①Real-time PCR反应系统的质量控制:反应结果应同时符合以下2个条件,否则试验结果无效,应重新开展检测。阴性对照无扩增,为阴性。阳性对照未出现阴性结果。 ②结果判定: A.阴性:双孔Ct值>37,或无Ct值; B.灰区:一孔Ct值>37; C.阳性:双孔Ct值<37。 所有阳性和处于灰区的标本应重复检测或经序列分析进行确诊。需注意:当标本仅为咽拭子或血清、血浆,且检测结果为阴性时,应结合临床症状,慎重做出阴性诊断。 表格记录 做好荧光定量实时PCR方法检测猴痘病毒核酸原始记录。 五、猴痘病毒全基因组测序 1.测序标本选取原则。本土疫情中的首发或早期病例、与早期病例有流行病学关联的关键病例、感染来源不明的本土病例、境外输入病例阳性标本等。以上标本在核酸荧光定量PCR检测Ct值≤32时进行测序(关键样本除外)。 2.测序要求。以省为单位确定开展猴痘病毒全基因组测序的机构。建议使用扩增子技术进行猴痘病毒全基因组测序。测序数据经质控合格后方可用于后续生物信息分析。二代测序平台覆盖深度应不低于10×,三代测序平台覆盖深度应不低于50×,全基因组测序覆盖度应不低于98%。数据比对分析推荐参考猴痘基因组NC_063383.1。 各省应建立本省输入、本土病例猴痘病毒基因组数据库,应具备序列对比分析能力。具备测序条件的省份要在接收标本后48小时内开展测序工作,关键样本要求实验室收到标本后1周内提供测序结果报告,所有测序原始数据(一般为fastq格式)、组装序列(一般为fasta格式)和标本序列测定结果报告单(见附件7-2)应在获得序列48小时内报送中国疾控中心病毒病所进行序列汇总、分析。病毒病所应将序列分析结果及时反馈各省,并将全国猴痘病毒序列汇总、分析结果及时上报国家疾控局。 3.分子分型。推荐使用在线分析工具Nextclade(https:// clades.nextstrain.org)对变异株进行分子分型。 附件: 7-1猴痘病毒检测标本送检表 7-2猴痘病毒标本序列测定结果报告单
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金融界
2023-07-27
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